Otros tres colonos fueron heridos, dijeron los servicios de emergencia de Israel.
Nadie se atribuyó el ataque aunque se apunta a Hamas.
La ruta es utilizada principalmente por soldados israelíes y por los colonos que habitan los asentamientos vecinos.
No estaba claro cómo se llevó a cabo el ataque. Un portavoz de los colonos dijo que se trató de palestinos en un automóvil porque los vehículos tiroteados estaban a cuatro kilómetros de distancia.
Emboscada
Sin embargo, la televisión israelí dijo que se trató de atacantes provenientes de la vecina localidad palestina de Yatta.
Dispararon contra el primer automóvil en el que mataron a dos adultos y un adolescente de 15 años de edad.
Luego esperaron por el segundo e hirieron al conductor, quien pudo controlar el vehículo hasta que murió. Tres personas fueron heridas, dos de ellas niños.
Un funcionario del gobierno de Israel dijo que el ataque «prueba que los palestinos están obsesionados con la idea de atacar israelíes».
Horas antes el ejército de Israel había efectuado una nueva incursión en la Franja de Gaza este viernes, hiriendo a al menos dos palestinos.